Практикум по аналитической химии аминокислот и белков

26 обменных колонках, детектирование аминокислот осуществляют спектрофотометрически. Для непосредственного анализа первичной структуры белков ис-пользуют секвенатор (от англ. sequence  последовательность) – прибор, осуществляющий последовательное автоматическое отщеп-ление N – концевых остатков аминокислот по методу П.Эрдмана. Методы и приемы исследования пространственной структу-ры (конформации) белка При исследовании вторичной, третичной и четвертичной струк-тур применяют два подхода: исследование в растворе и кристалличе-ском состоянии. Рентгеноструктурный кристаллографический анализ является основным методом получения непосредственной информации о про-странственном расположении атомов в молекуле белка. Метод осно-ван на дифракции рентгеновских лучей электронами, окружающими ядра атомов в кристалле белка. На фотопленке, помещенной за кри-сталлом, рентгеновское излучение дает дифракционную картину, ха-рактерную для третичной, вторичной структур белка. С использова-нием информации, полученной с помощью рентгеновской дифракци-онной картины белковых кристаллов, возможно создание карт элек-тронной плотности, отражающих расположение атомов в белках. Имея такие карты и зная аминокислотную последовательность, мож-но определить трехмерную структуру белка. Рентгеноструктурный анализ применим только для хорошо кристаллизующихся белков. Однако кристаллизация белков является трудоемкой задачей, и дале-ко не каждый белок можно получить в кристаллическом состоянии. В отличие от рентгеноструктурной кристаллографии, ядерно-магнитная резонансная (ЯМР) спектроскопия позволяет изучать бел-ки в растворах. ЯМР спектроскопия, основанная на абсорбции элек-тромагнитного излучения молекул в магнитных полях, устанавливает состояние спинов определенных атомных ядер (обычно водородных атомов). С помощью этих данных и зная аминокислотную последова-тельность белка, можно определить его конформацию. Исследовани...