Труды лаборатории по изучению белка

Изучению реакции формалина с белковыми веществами посвящен ряд исследований. Еще в 1896 г. Блюмом [8] было высказано предположение, что реакции присоединения формалина к протеину могут итти с NH2-rpyn-пами с отдачей воды по следующим схемам: 1. R — N H3 -Ь НСНО 2. R — NH. R — N H2 + НСНО R — N - С Н2+ Н30 . R — N H4 ) С Н3+ Н20 R — N HX Напротив, Бенедисетти [9], получая метиленпроизводное казеина, пред­полагал, что реакция между аминогруппой и формалином может итти без выделения воды по схеме 3: 3. R - N H2+ H C H O - ^ R N H ^ O H . хн Предположенные схемы, однако, не нашли до настоящего времени пря­мого экспериментального подтверждения. Количественная сторона реакции альдегидов с протеином затронута в исследованиях Кураева [10], давшего эмпирическую формулу метиленпро-изводного сывороточ­ного альбумина, и Шварца [11], изучав­шего реакцию эдести-на и альбумина и его иодпроизводных с фор­малином и другими альдегидами, причем установлено, что при длительном воздей­ствии НСНО на аль­бумин последний при­соединяет 43—46 мо­лекул формалина на 100 г азота протеина. В позднейших ра­ботах Зоренсен [12], основываясь на реак­ции формалина с ами­ногруппами, предло­жил количественный способ учета свободных аминогрупп в протеинах и продуктах их распада путем непосредственного титрования освобождающихся при реакции СООН-групп: 4. N H2 — R — СООН + НСНО -> С Н3= N — R - СООН + Н20 . В свете современной цвиттерионной теории Бьеррума [13] о строении амфолитов указанная реакция формалина с аминокислотами и протеинами, как это наглядно показал Гаррис [14], полно протекает только в сильно­щелочной среде, потому что в этих условиях цвиттерион (NH^"— R—СОО~) переходит в анион (NH2—R—COO), реагирующий с альдегидом с образова­нием метиленпроизводного [15]. Электрометрическое титрование раствора казеина (по водородному ка­ломельному электроду), проведенное нами в присутствии 0.0 (А); 0.1 (В); 1.0(C) /лНСНО, подтверждает образование метиленказеиновой кислоты (рис. 2). Смещени...